酶法检测氨(试剂盒代测)
一、概况
在血清或血浆中氨的浓度是很低的(成年人,40~110微克/100毫升;新生婴儿,90~150微克/100毫升)。血清氨的测定对于肾病研究没有多大的价值。在梗阻性或持续性的肝病患者中观察到血清氨浓度明显地增加。
尿液中氨的水平可用作肾脏产氨能力的指标,其正常值为500~1200毫克/24小时。
在进行氨样品检测时,操作要极端小心,因为尿液(或血液)中的尿素可以被细菌的脲酶分解而产生NH,引起高NH值低尿素值。
氨在农业化学、肥料和土壤增肥剂中也相当重要。
二、分析方法
所有酶分析方法都采用谷氨酸脱氢酶GIDH[L-谷氮酸: NAD(P)氧化还原酶(脱氨),E.C.1.4.1.3]。
最适 pH为8。牛肝酶已有商品供应,其动力学常数如下:
此反应可以通过340nm吸光率的降低进行跟踪。在胺类物质存在下,这种酶分析专一于氨。
有文献首先应用此法测定了组织体液中的氮;文献也曾用这种方法检测了体液NH3。有文献推荐用此法来测定血NH3,也建议将它用于血液和组织的分析。
此法检测范围为10~80微克分子NH(相当于0.2~1.4微克NH3/毫升检测溶液),准确度为1~2%。
文献中通过测定NADH荧光度的降低(入激发=340nm;入发射=460nm),提高了检测灵敏度,它可检测4x10-11到2x10-10克当量的NH3。
在这种动力学方法中,NADH荧光的消失是通过连续跟踪检测的。检测的快速消除了由于生物材料产生NH而引起的误差,这种误差常发生于其它冗长的消化与分离程序中。
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