6种核酸检测试剂性能存差异 业内呼吁优先采集下呼吸道标本

　　国家卫生健康委办公厅、国家中医药管理局办公室此前印发的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（试行第五版）》在湖北省的病例诊断分类中增加了“临床诊断”，以便患者能及早按照确诊病例接受规范治疗，进一步提高救治成功率。

　　根据该方案，近期湖北省对既往的疑似病例开展了排查并对诊断结果进行了订正，对新就诊患者按照新的诊断分类进行诊断。为与全国其他省份对外发布的病例诊断分类一致，从2月13日起，湖北省将临床诊断病例数纳入确诊病例数进行公布。

　　尽管如此，试剂盒作为检测“金标准”之一仍存在性能差异的局面，业内对于试剂盒常用的咽鼻拭子不准确，运输过程难控制和批件差异仍存担忧。

　　2月12日，重庆市人民医院三院院区检验科主治医师郭元元等人在《重庆医学》上发表了《6种国产新型冠状病毒核酸检测试剂检测性能比较与分析》，对比了6种不同核酸检测试剂的性能。

　　“试剂确实存在性能差异。而咽鼻拭子不准主要是取材的问题，新冠肺炎病变主要在肺的深部，应优先采集下呼吸道标本。”中山大学附属第三医院检验科周文营副主任技师向21世纪经济报道记者说道。

　　核酸检测试剂性能差异大

　　2月12日，重庆市人民医院三院院区检验科主治医师郭元元等人在《重庆医学》上发表了《6种国产新型冠状病毒核酸检测试剂检测性能比较与分析》，对比了6种不同核酸检测试剂的性能，这6种试剂盒被划分为六组，分别为A组（湖南圣湘生物科技有限公司），B组（卡尤迪生物科技有限公司），C组（江苏硕世生物科技股份有限公司），D组（重庆中元生物技术有限公司），E组（中山大学达安基因股份有限公司），F组（北京卓诚惠生生物科技股份有限公司）。

　　结果显示，在准确性方面，六种试剂盒中，C试剂（硕世生物）和F试剂（惠生生物）表现较好，对新型冠状病毒（2019-nCoV）的ORF1ab基因和N基因都能检测出来。至于另外四种试剂盒，其中D试剂对新冠病毒的N基因缺乏检测能力，而A、B、E试剂对新冠病毒的ORF1ab的检测能力欠佳。

　　在整体检出率上，A试剂试剂检出率为66.6%（4/6），B试剂试剂检出率为66.6%（4/6）、C试剂试剂检出率100.0%（6/6）、D试剂试剂检出率50.0%（3/6）、E试剂试剂检出率83.3%（5/6）、F试剂试剂检出率100.0%（6/6）。

　　该论文提到，被检测患者为感染初期到确诊的患者，理论上，患者病毒载量应该越来越高，所对应检测结果的CT值应该越来越小，但在实验中，仅有F试剂（N和ORF1ab）、 E试剂（ORF1ab）和A试剂（ORF1ab）3次检测结果的CT值有趋势性变化。

　　什么原因导致性能差异？

　　为何这些试剂盒在检测性能上有不同的表现？该论文分析指出了两点原因，其一，可能与试剂引物设计有关。其二，可能与各位点检测灵敏度相关，该实验所采用的样本为弱阳性，样本浓度相对较低，部分试剂盒可能在灵敏度上未达标。

　　不过论文同时指出，该实验样本量有限，实验结果并不一定能反映试剂的整体检测性能。

　　该实验只收集了一名患者（男，51岁）在不同时间段的咽拭子标本。另外，除去试剂盒本身的检测能力外，在实际检测中，检测操作过程可能会出现人为失误和操作不当，因而操作人员应在生物安全防护下严格遵循标准操作流程，严格质量控制，避免由于操作原因引起假阴性和假阳性结果。

　　值得注意的是，该实验所采集的样本为咽拭子样本。2月12日发表于《中国人兽共患病学报》上的一篇研究文章指出，痰标本的病毒含量高于咽拭子标本，痰标本的检测效果优于咽拭子，他们用试剂盒分别检测了咽拭子标本和痰标本，其中有两例病例的咽拭子检测结果为阴性，而痰标本检测结果为阳性。

　　痰标本的病毒含量之所以高于咽拭子标本，可能是因为新型冠状病毒主要侵袭感染的是下呼吸道细胞，通过咳嗽等临床表现病毒才得以向上呼吸道扩散，因此在感染初期，病毒往往集中在肺部。

　　这篇研究文章建议，以咽拭子病毒核酸检测阴性作为排除感染及治愈标准在实施过程中需谨慎，必要时应当采集痰等其他标本进行检测。

　　2月4日，国家医疗专家组成员、北京地坛医院感染性疾病诊疗与研究中心首席专家李兴旺在国家卫健委发布会上表示：“从呼吸道标本来讲，肺泡灌洗液敏感性要高于痰的结果，痰的结果又高于咽部的。”

　　这就是说，从核酸检测所采集的样本来看，肺泡灌洗液的检测结果通常是最准确的，而痰液的准确性其次，鼻咽试子检测的准确性最低，但是核酸检测中可操作性最强的又往往就是鼻咽子检测。危重患者的诊断率之所以高，就是因为能够采集到肺泡灌洗液，但是一般病患无法都去采集（肺泡灌洗液）。

　　此外，新型冠状病毒的诊断有其特殊性。感染新型冠状病毒的患者在早期阶段出现临床症状时，如发热等，如果没有出现咳嗽的情况，病毒在患者体内可能还未快速释放，上呼吸道、包括鼻咽部的病毒量很少，主要集中在肺部。此时，如果采集鼻咽试子进行检测，检测结果很可能是阴性，也可能导致漏检。

　　但对此，有医务人员也向21世纪经济报道记者表示：“这样病人的传染性也小，因为上呼吸道没有检测到，提示它传染性不强。目前也有一些回溯性的研究表明，某些情况下对于重症和轻症患者来说准确性也有区别。”

　　“抗击疫情的矛盾点，第一轮挑战在于试剂盒的产能不足、不规范与疑似病例过多。这点通过药监局快速审批，已缓解。但第二轮挑战马上来了，就是大量试剂盒的性能一致性问题，以及追求检测速度可能带来的漏检和错检问题。”华南某体外检测业内人士对21世纪经济报道记者表示。

　　而随着CT等临床诊断标准在湖北省的纳入，新冠肺炎患者确诊的难题得以缓解。

　　周文营对21世纪经济报道记者表示：“目前其他省市都能及时做CT和核酸，确诊的都集中收治，诊断相对压力更小一些。”