为什么核酸纯化做不好?看完这些原因别再深夜 emo

  师弟

  师兄,又要组会汇报了,我现在很头疼,提取的核酸纯度和浓度都很低,而且我的实验样品只剩一点了。

  你步骤都操作正确了吗?

  师兄

  师弟

  我完全是按照 protocol 来操作的,提了 2 个多小时,从研磨、抽提到离心,一步都没敢离开,但是结果依然不行。

  师弟,不用担心,提取和纯化要找对方法,我不到 30 分钟就提完了,我来帮你解决,保证你这周组会有结果汇报。

  师兄

  核酸纯化是分子生物学的基础,纯化产物质量的好坏直接影响后续实验的最终结果。想必每一个初入实验室的科研人,都曾经历过核酸提取和纯化的各种挑战,结果还总是差强人意,不仅影响实验进度,而且还令人心情无比 emo。选择了合适简便的实验方法,便能拥有事半功倍的效果。

  目前,离心柱法纯化核酸是使用最为普遍的一种纯化方法,其便捷,快速和高产量的特点深受科研人员的喜爱。工欲善其事必先利其器,让我们一起了解一下离心柱法纯化核酸吧!

  一、离心柱法纯化核酸的原理是什么呢?

  核酸表面水分子结构薄膜在高盐环境下会遭到破坏,从而吸附在离心柱上,而等其他杂质会被离心沉淀的原理,通过洗脱从而达到核酸分离纯化的效果。

  离心柱法纯化核酸的步骤一般分为:裂解,结合,洗涤,洗脱四个步骤,如下图。

  裂解:破坏组织,细胞等,将核酸释放出来。

  结合:在高盐环境下,核酸结合到离心柱上。

  洗涤:利用缓冲液,洗涤并离心沉淀杂质。

  洗脱:通过洗脱液将核酸从吸附膜上脱离下来获得纯化后的核酸。

  二、离心柱法相对于其他提取方法的优势在哪?

  离心柱法与有机法,磁珠法,都因各自独特的优势,在不同应用领域发挥重要的作用。

  和有机法相比,离心柱法更加便捷,高效,通常 30 分钟内可以完成纯化。其纯化产物的得率也会高于有机法。

  更重要的是通过对试剂盒缓冲液及吸附膜的优化,离心柱法更能应对多种样本类型,例如:血液,,植物,拭子,病毒,细菌等。针对不同应用,可以纯化某一类特定的核酸,例如质粒,mRNA,MicroRNA 等。

  和磁珠法相比,离心柱法的通量更加灵活,不需要配备仪器。让高质量的核酸纯化,以高性价比的方式进入每一个分子生物学实验室。

  针对不同产物类型,选择不同纯化工具对于实验的成功是至关重要的。

  为了解决核酸提取困难、提取和纯化过程繁琐且低效、核酸浓度低且纯度差的困扰,简化并加速核酸纯化过程,赛默飞提供适用于各种样本类型和研究领域的核酸纯化。该系列试剂盒为您的实验保驾护航,助力您先人一步,又快又好地完成核酸纯化实验!

  热门促销产品

  GeneJET 无内毒素质粒大提试剂盒

  货号: K0861

  超纯净:适用于敏感细胞转染,内毒素<0.1 EU/μg

  高得率:350 mL 菌液可以得到高达 1,000 μg 质粒

  低耗时:高质量质粒 DNA 分离时间短于 60 分钟

  PureLink? RNA 小提试剂盒

  货号: 12183025

  效率高:20 分钟内处理来自 5~200 mg 动物/植物组织或 0.5 x 106 至 108 个组织培养细胞

  产量多:每一根柱子可纯化获得高达 1,000 μg 总 RNA

  残留少:分离的 RNA 可用于大多数应用,无需进一步 DNase 处理(非常低的残留 DNA)

  RevertAid? 第一链 cDNA 合成试剂盒(含 DNase I)

  货号:K16225

  在 42~50℃ 范围内保持活性,最佳反应温度为 42℃

  可合成长达 13 kb 的 cDNA

  完整试剂盒,提供 cDNA 合成所需所有组分

  整合 gDNA 去除步骤,5 分钟去除 gDNA 污染

  RevertAid? 第一链 cDNA 合成预混液(含DNase I)

  货号:M16325

  快速:42℃ 反应 30 min,当 RNA 样本量低于 1,000 ng 时,反应时间可缩短至 15 min

  方便:较少的移液步骤,简单的实验流程

  双管式预混液,在方便使用的同时,便于设置对照反应

  整合 gDNA 去除步骤,5 分钟去除污染的 gDNA

  <<<往左滑动,查看更多 >>>

  更多相关产品,火热促销中,详细请点击文末阅读原文或咨询赛默飞销售及代理商。

  内容审核:潘成项目审核:吴军

  题图来源:图虫创意

  图片来源:赛默飞