为什么核酸纯化做不好?看完这些原因别再深夜 emo
师弟
师兄,又要组会汇报了,我现在很头疼,提取的核酸纯度和浓度都很低,而且我的实验样品只剩一点了。
你步骤都操作正确了吗?
师兄
师弟
我完全是按照 protocol 来操作的,提了 2 个多小时,从研磨、抽提到离心,一步都没敢离开,但是结果依然不行。
师弟,不用担心,提取和纯化要找对方法,我不到 30 分钟就提完了,我来帮你解决,保证你这周组会有结果汇报。
师兄
核酸纯化是分子生物学的基础,纯化产物质量的好坏直接影响后续实验的最终结果。想必每一个初入实验室的科研人,都曾经历过核酸提取和纯化的各种挑战,结果还总是差强人意,不仅影响实验进度,而且还令人心情无比 emo。选择了合适简便的实验方法,便能拥有事半功倍的效果。
目前,离心柱法纯化核酸是使用最为普遍的一种纯化方法,其便捷,快速和高产量的特点深受科研人员的喜爱。工欲善其事必先利其器,让我们一起了解一下离心柱法纯化核酸吧!
一、离心柱法纯化核酸的原理是什么呢?
核酸表面水分子结构薄膜在高盐环境下会遭到破坏,从而吸附在离心柱上,而等其他杂质会被离心沉淀的原理,通过洗脱从而达到核酸分离纯化的效果。
离心柱法纯化核酸的步骤一般分为:裂解,结合,洗涤,洗脱四个步骤,如下图。
裂解:破坏组织,细胞等,将核酸释放出来。
结合:在高盐环境下,核酸结合到离心柱上。
洗涤:利用缓冲液,洗涤并离心沉淀杂质。
洗脱:通过洗脱液将核酸从吸附膜上脱离下来获得纯化后的核酸。
二、离心柱法相对于其他提取方法的优势在哪?
离心柱法与有机法,磁珠法,都因各自独特的优势,在不同应用领域发挥重要的作用。
和有机法相比,离心柱法更加便捷,高效,通常 30 分钟内可以完成纯化。其纯化产物的得率也会高于有机法。
更重要的是通过对试剂盒缓冲液及吸附膜的优化,离心柱法更能应对多种样本类型,例如:血液,,植物,拭子,病毒,细菌等。针对不同应用,可以纯化某一类特定的核酸,例如质粒,mRNA,MicroRNA 等。
和磁珠法相比,离心柱法的通量更加灵活,不需要配备仪器。让高质量的核酸纯化,以高性价比的方式进入每一个分子生物学实验室。
针对不同产物类型,选择不同纯化工具对于实验的成功是至关重要的。
为了解决核酸提取困难、提取和纯化过程繁琐且低效、核酸浓度低且纯度差的困扰,简化并加速核酸纯化过程,赛默飞提供适用于各种样本类型和研究领域的核酸纯化。该系列试剂盒为您的实验保驾护航,助力您先人一步,又快又好地完成核酸纯化实验!
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内容审核:潘成项目审核:吴军
题图来源:图虫创意
图片来源:赛默飞