维生素E检测试剂盒（可见分光光度法）

　　维生素E检测试剂盒（可见分光光度法）

　　产品货号：BA1386

　　产品规格：50管/24样

　　产品简介：

　　维生素E（Vitamin E）是一种天然脂溶性抗氧化剂，能阻断机体不饱和脂肪酸的过氧化，维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能，并可清除超氧阴离子自由基，具有延缓衰老、预防溶血性贫血等作用，在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。

　　VE还原Fe3+为Fe2+，Fe2+与1,10-菲罗啉产生有色络合物，在510nm有特征吸收峰。

　　技术指标：

　　最低检出限：3.0152μg/mL

　　线性范围：3.125-50μg/mL

　　注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

　　产品组成：

　　

　　溶液的配制：

　　1. 试剂一：自备无水乙醇，常温保存。

　　2. 试剂二：自备正庚烷，常温保存。

　　3. 试剂五贮备液的制备：将试剂五的粉剂溶于2mL无水乙醇配制成贮备液，4℃避光保存待用。

　　4. 试剂五应用液的制备：取试剂五贮备液用无水乙醇20倍稀释后使用，建议当天配制当天使用。

　　5. 标准品：临用前加入1mL试剂三，配成20mg/mL的标准品溶液。

　　需自备的仪器和用品：

　　可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、漩涡震荡仪、无水乙醇、正庚烷、蒸馏水和EP管。

　　操作步骤：

　　一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

　　1. 组织样本

　　

　　注意：吸取上层正庚烷抽提液时，切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入。

　　2. 血清（血浆）样本

　　

　　注意：离心后，吸取上层正庚烷抽提液时，切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入。

　　二、测定步骤

　　1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至510nm，无水乙醇调零。

　　2. 标准溶液的制备：将20mg/mL标准液用试剂三稀释为50、25、12.5、6.25、3.125g/mL的标准溶液备用。

　　3. 操作表：（在1.5mL离心管中依次加入下列试剂）

　　

　　三、维生素E含量计算

　　1. 标准曲线的绘制：

　　以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA带入方程得到x（μg/mL）。

　　2. 维生素E含量的计算：

　　（1）按样本质量计算

　　VE含量（μg/g质量）=x×4×V样总÷W=2x÷W

　　（2）按血清（血浆）体积计算

　　VE含量（μg/mL）=x×4×V样总÷V血清（浆）=10x

　　4：待测样本为300L的正庚烷抽提液加900L的无水乙醇，相当于将抽提样本稀释4倍后检测；V样总：提取过程加入正庚烷的体积，0.5mL；W：样本质量，g；V血清（浆）：提取过程中加入血清（浆）体积，0.2mL。

　　注意事项：

　　1. 离心后，在吸取上层正庚烷抽提液时，切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入，以免影响试验结果。

　　2. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

　　3. 若反应体系产生沉淀，建议将待测样本用试剂三进行适当的稀释，并在计算公式中乘以稀释倍数。

　　4. 检测过程中，比色皿需用无水乙醇冲洗，勿用蒸馏水以防出现分层影响试验数据。

　　5. 显色结束后尽快完成测定。

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