科普讲堂 ｜ 一起聊聊核酸纯化的方法~

　　原标题：科普讲堂 | 一起聊聊核酸纯化的方法~

　　Boom在1990年开发了一种方法，利用二氧化硅颗粒与核酸的磷酸基团形成可逆的盐桥。通过这种方式，可以从基质中捕获核酸（见图1）。

　　这些二氧化硅颗粒可以被离心分离，并与分离物中的其他成分分开。丢弃上清液后，可以加入洗涤缓冲液来重新悬浮颗粒，然后再次离心。通过一些清洗和离心步骤，硅酸盐/DNA复合物与污染物如蛋白质、脂质和其他（大）分子分离，而不像苯酚-氯仿提取那样使用有毒物质。通过将二氧化硅颗粒与各种载体（例如顺磁珠）耦合，有可能简化和自动完成洗涤步骤，并相对容易地从复杂的溶液中分离出DNA。

　　在洗涤步骤之后，核酸在小体积的低摩尔的缓冲液（含10mM TrisHCl/0.1mM EDTA pH 8.2）中从二氧化硅颗粒中被洗脱出来。纯化的核酸可以被定性并立即用于进一步的步骤。

　　如今，Boom方法被纳入了自动化系统。通过这种方式，许多样品可以以标准化和无污染的方式被分离出来，这对诊断实验室来说是至关重要的。

　　为了保存核酸分离物，可以将洗脱缓冲液蒸发掉，得到易于在室温下保存的固体亲水粉末。在使用前，通常将该粉末溶解在相同体积的无核酸酶的水中。另一种方法是将洗脱液冷冻，储存在-20℃或-80℃。

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