MacroGenics 双抗／三抗技术平台梳理

　　双抗根据是否具有Fc结构域可分为全长双抗和片段双抗，开发这两类抗体的技术平台各具特色，本文主要介绍片段双抗技术平台中的代表企业之一MacroGenics。

　　

　　MacroGenics的抗体平台包括用于双抗开发的DART? 和用于三抗开发的TRIDENT? 。

　　DART与TRIDENT抗体特性[1]

　　DART平台

　　DART技术平台是由MacroGenics公司和Servier公司联合开发的双抗构建技术，该技术能够解决双抗不稳定、短半衰期以及合成低效率的问题。

　　结构上，基于该平台开发的双抗分子是由两条多肽链结合形成的异源二聚体抗体：

　　每条肽都包含一个VL结构域、短连接体、VH结构域、一个包括半胱氨酸的第二连接体和一个异源二聚结构域，半胱氨酸残基将两个肽链共价连接，形成链间二硫键，提高结构稳定性；同时，在基础DART分子上加FC片段，可将半衰期从数小时提高到数天数周；DART抗体几乎可以容纳任何可变区域序列，并具有可预测的表达、折叠和抗原识别。

　　

　　

　　A：基础DART分子结构；B：含Fc的二价DART分子；C：含Fc的四价DART分子[1]

　　主要作用机制有两种，一种是重定向T细胞的激活和杀伤。使免疫效应细胞（如T淋巴细胞）识别并与癌细胞上表达抗原结合、 招募所有类型的细胞毒或细胞杀伤T细胞，而不考虑其识别癌细胞的能力以及触发T细胞激活、扩增和细胞杀伤机制以摧毁癌细胞。此外，靶向多个共同抑制性受体或检查点，疗效较单抗甚至单抗联用要更有优势(如后文中的MGD013)。

　　

　　

　　CD3工程化DART分子实现T细胞重定向杀伤

　　MGD024和Flotetuzumab是基于DART技术平台开发的的CD123/CD3双抗分子，Flotetuzumab是一种持续输注的CD123 x CD3 DART分子。MGD024是第二代CD123 x CD3 DART分子，在设计上延长了半衰期，减少了细胞因子的释放，因此适合间歇性给药。其主要适应症为急性髓系白血病（AML）。

　　Flotetuzumab（左）与MGD024（右）结构

　　临床前研究表明，低亲和力的CD3 DART变体保留了完整的细胞溶解潜力，同时能够减少细胞因子的释放。

　　

　　低亲和力CD3 DART分子能够诱导靶向依赖性T细胞扩增。

　　

　　CD123 x CD3-V2 DART变体在体外介导急性髓系白血病细胞的耗竭。

　　

　　体内研究中，CD123 x CD3-V2 DART变体在人类PBMC重建的小鼠模型中表现出抗肿瘤活性。

　　

　　双靶点抑制剂增强抗肿瘤活性

　　MGD013是基于DART技术平台开发的PD-1/LAG-3 lgG4四价双抗，是一种结构稳定的检查点抑制剂，通过同时靶向PD-1和LAG-3来恢复T细胞效应功能并增强抗肿瘤活性。

　　

　　MGD013能够阻断PD-1/PD-L1/PD-L2和LAG-3/MHC-Class II的相互作用，并产生抑制性信号，其效力与PD-1单抗（MGA012）和LAG-3单抗（nivolumab或25F7）相当。

　　

　　单个mAb或联合mAb阻断相比，MGD013能增强T细胞反应，促进IFN-γ的分泌。

　　

　　TRIDENT平台

　　TRIDENT平台是DART技术平台延伸的三特异性抗体技术平台，作用机制更为广泛。

　　在结构上，一个TRIDENT分子包含一个DART单元和一个Fab片段，每个单元都与Fc结构域的CH2/CH3肽的N端相连。TRIDENT结构与二价Fc结构的DART共享链1和链2。链3和链4分别是来自常规抗体的重链和轻链，不同的是链3的Fc结构域必须包含 "hole" 突变以防止链3同质体的形成。

　　[1]

　　2018年11月,再鼎医药引进Macrogenics的HER2抗体margetuximab、PD-1/LAG-3双抗MGD013和一款TRIDENT平台的三特异性抗体,交易对价为2500万美元预付款+1.4亿美元里程碑金额。

　　参考

　　https://doi.org/10.1002/cpim.95https://macrogenics.com/wp-content/wbuploads/wb_publications/Keystone-2018-Tailoring-Cytolytic-Activity-Proliferation-and-Cytokine-Release.pdf企业官网https://mp.weixin.qq.com/s/Mo4oFSgQgdM_D2rOK49aPQ